核酸检测是目前诊断新冠肺炎(COVID-19)的金标准,检验样本主要是咽拭子,但由于种种原因,常常出现检测假阴性以及治愈后复阳,使其敏感性和可靠性受到诸多质疑,更是对患者的早诊断及康复判断造成一定影响。不过,3月28日,北京地坛医院张福杰教授团队发表在《Clinical Infectious Diseases》的一项研究或许能解决这一问题。
新研究:检测新冠病毒 痰样本比咽拭子更准确
近期几项研究显示,微液滴数字PCR(ddPCR)技术可以定量病毒载量,并且敏感性比核酸检测更强。
发表在《Clinical Infectious Diseases》的该项研究,选择了不同组织标本(鼻拭子、咽拭子、痰样本、尿样、血浆)以及疾病不同发展阶段患者,比较了ddPCR与实时荧光定量PCR(RT-PCR)在新冠病毒检测中的应用效果。
研究共纳入76名患者,平均年龄40岁,77.6%%是轻症型,22.4%是重症型。研究人员共采集了323份样本进行RT-PCR检测和ddPCR检测,包括痰样本116份、咽拭子134份、鼻拭子55份、尿样14份和血浆4份。
结果发现,在两种方法均检测为阳性的95份样本中,RT-PCR的循环阈值(Ct)与ddPCR的拷贝数高度相关(ORF1ab基因,R2=0.83;N基因,R2=0.87)。通过RT-PCR检测的4份(4/161)阴性和41份(41/67)单基因阳性样本,根据ddPCR检测为阳性,病毒载量范围为11.1~123.2 copies/test。由此可见,ddPCR检测的敏感性更强。
在不同组织的比较中,16%的鼻拭子、37.3%的咽拭子以及66.4%的痰样本呈阳性,证明痰样本阳性率高于咽拭子和鼻拭子。
而比较呼吸道样本的病毒载量发现,痰样本中的平均病毒载量(17429±6920 copies/test)显著高于咽拭子(2552±1965 copies/test,p<0.001)和鼻拭子(651±501 copies/test,p<0.001)。由此可见,痰样本可以更直观地体现患者体内的病毒水平。
此外,通过痰样本分析发现,疾病早期和进展期的病毒载量显著高于恢复期的病毒载量(46800±17272 vs 1252±1027,p<0.001)。因此,早期诊断并采取隔离措施,对于减少传播和控制疾病非常重要。
作者认为,下呼吸道样本中病毒载量的定量监测有助于评估疾病进展,尤其是在病毒载量低的情况下。
揪出新冠病毒 还需多措并举
上述研究显示,对于COVID-19患者来说,下呼吸道病毒载量更高,且能够更好地反映出患者的病毒复制水平。进行痰样本检测,无疑将增加阳性患者的检出率,降低假阴性风险。
此外,痰样本检测也更有利于进入恢复期低病毒载量的患者的监测评估,提高诊断的敏感性,降低假阴性复阳风险。
但现实情况却是,很多新冠肺炎病患干咳、无痰。因此,揪出新冠病毒,还需多措并举!
(环球医学编辑:常路)
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Clinical Infectious Diseases,28 March 2020
Quantitative Detection and Viral Load Analysis of SARS-CoV-2 in Infected Patients
https://academic.oup.com/cid/advance-article/doi/10.1093/cid/ciaa345/5812997